Mikroskopi tingkat lanjut
Mikroskopi Raman (CARS & SRS)
CARS dan SRS dipakai untuk pencitraan getaran cepat, peka, tanpa label.
Pengantar produk
Apa yang ditambahkan CARS dan SRS
Pencitraan getaran memberikan spesifisitas kimia, yang berguna pada mikroskopi biologis serta ilmu farmasi dan material, terutama apabila teknik mikroskopi lain memberikan hasil yang ambigu dan label tidak dapat dipakai. Mikroskopi hamburan Raman spontan, meskipun peka, berlangsung lambat. Namun, padanan nonlinearnya – hamburan Raman anti-Stokes koheren (CARS) dan hamburan Raman terstimulasi (SRS) – dapat dipakai untuk pencitraan getaran tanpa label berkecepatan tinggi dan berkepekaan tinggi.
Bagaimana CARS dan SRS berbeda
Pada mikroskopi CARS, dua berkas dipakai untuk menghasilkan radiasi pada panjang gelombang ketiga melalui suatu tingkat getaran sampel. Selisih energi antara kedua berkas dapat ditala ke tingkat getaran yang berbeda, sehingga memberikan kontras pencitraan kimia. Sinyal CARS yang dihasilkan berada pada panjang gelombang lain yang biasanya bebas latar, sehingga deteksinya relatif sederhana. Namun, CARS mendistorsi bentuk garis getaran dan memiliki komponen sinyal nonresonan, yang mempersulit atribusi kimia. SRS bebas dari kelemahan tersebut; namun, sinyalnya adalah modulasi kecil pada salah satu berkas datang dan memerlukan skema deteksi yang rumit.
CRONUS-2P untuk Raman dua berkas
CRONUS-2P adalah laser femtosekon yang menyediakan tiga keluaran simultan dan tersinkronisasi dengan laju pengulangan tinggi, daya keluaran tinggi, durasi pulsa pendek, dan kendali GDD. Dua keluaran dapat ditala secara independen pada rentang 680–960 nm dan 940–1300 nm, sedangkan yang ketiga tetap pada 1025 nm. Ketiga keluaran simultan itu memungkinkan penerapan CARS dan SRS tingkat lanjut dengan pencitraan pita ganda, pilihan frekuensi resonansi getaran yang lebih luas, penalaan dua berkas berselisih konstan, dan penguatan resonan.
SRS bahan polimer
(a) Spektrum Raman spontan dan SRS bahan polimer, dinormalisasi terhadap puncak maksimum molekul yang diminati. (b) Citra SRS manik PS yang diwarnai dan yang tidak diwarnai. Citra direkam menggunakan CRONUS-2P.
SRS sel dan β-carotene
(a) Pencitraan inti sel HeLa terfiksasi yang diwarnai AZ568 dengan SRS (merah) dan fluoresensi (hijau). (b) Spektrum SRS dan Raman spontan (pada 488 nm) larutan 1 mM AZ568 dalam DMSO-d6. (c) Struktur β-carotene. (d) Spektrum β-Carotene yang direkam dengan SRS dan Raman spontan. (e) Spektrum pemfokusan spektral larutan β-carotene dalam DMSO-d6. Citra direkam menggunakan CRONUS-2P.
