Fortgeschrittene Mikroskopie
Raman-Mikroskopie (CARS & SRS)
CARS und SRS dienen der schnellen, empfindlichen markierungsfreien Schwingungsbildgebung.
Produktbeschreibung
Was CARS und SRS hinzufügen
Die Schwingungsbildgebung liefert chemische Spezifität, die in der biologischen Mikroskopie sowie in der Pharmazie und der Materialwissenschaft nützlich ist, insbesondere dort, wo andere Mikroskopietechniken mehrdeutige Ergebnisse liefern und Marker nicht verwendet werden können. Die Mikroskopie der spontanen Raman-Streuung ist zwar empfindlich, aber langsam. Ihre nichtlinearen Gegenstücke – kohärente Anti-Stokes-Raman-Streuung (CARS) und stimulierte Raman-Streuung (SRS) – können jedoch für schnelle und hochempfindliche markerfreie Schwingungsbildgebung eingesetzt werden.
Worin sich CARS und SRS unterscheiden
In der CARS-Mikroskopie werden zwei Strahlen verwendet, um über ein Schwingungsniveau der Probe Strahlung bei einer dritten Wellenlänge zu erzeugen. Die Energiedifferenz zwischen den beiden Strahlen kann auf verschiedene Schwingungsniveaus abgestimmt werden und liefert so chemischen Bildgebungskontrast. Das erzeugte CARS-Signal liegt bei einer anderen Wellenlänge, die in der Regel untergrundfrei ist, was die Detektion relativ einfach macht. CARS verzerrt jedoch die Schwingungslinienformen und besitzt eine nichtresonante Signalkomponente, was die chemische Zuordnung erschwert. SRS ist frei von diesen Nachteilen; das Signal ist jedoch eine kleine Modulation auf einem der einfallenden Strahlen und erfordert ein aufwendiges Detektionsschema.
CRONUS-2P für Dual-Beam-Raman
CRONUS-2P ist ein Femtosekundenlaser, der drei gleichzeitige und synchronisierte Ausgänge mit hoher Wiederholrate, hoher Ausgangsleistung, kurzer Pulsdauer und GDD-Kontrolle bereitstellt. Zwei Ausgänge sind unabhängig in den Bereichen 680–960 nm und 940–1300 nm durchstimmbar, der dritte ist fest bei 1025 nm. Die drei gleichzeitigen Ausgänge ermöglichen fortgeschrittene CARS- und SRS-Anwendungen mit Dual-Band-Bildgebung, einer breiteren Auswahl an Schwingungsresonanzfrequenzen, Dual-Beam-Abstimmung mit konstanter Differenz und resonanter Verstärkung.
SRS polymerer Materialien
(a) Spontane Raman- und SRS-Spektren polymerer Materialien, normiert auf den Maximalpeak des Moleküls von Interesse. (b) SRS-Bilder gefärbter und ungefärbter PS-Beads. Die Bilder wurden mit CRONUS-2P aufgenommen.
SRS von Zellen und β-carotene
(a) Bildgebung der Zellkerne von AZ568-gefärbten, fixierten HeLa-Zellen mit SRS (rot) und Fluoreszenz (grün). (b) SRS- und spontanes Raman-Spektrum (bei 488 nm) einer 1 mM Lösung von AZ568 in DMSO-d6. (c) Struktur von β-carotene. (d) β-Carotene-Spektrum, aufgenommen mit SRS und spontaner Raman-Streuung. (e) Spectral-Focusing-Spektrum einer β-carotene-Lösung in DMSO-d6. Die Bilder wurden mit CRONUS-2P aufgenommen.
